Em formação

Como você expressa e detecta os receptores GLP-1?

Como você expressa e detecta os receptores GLP-1?



We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Atualmente, estou trabalhando com um peptídeo que é um análogo do glp-1, mas durante os estudos invitro não sou capaz de detectar a presença de receptores de GLP1. A linha celular usada é Min-6. Como faço para detectar isso?


A questão é um pouco obscura, pois não esclarece se o receptor GPL-1 é endógeno ou se está superexpresso. O GLP-1 também pertence à mesma espécie que originou Min-6 ou pertence a uma espécie diferente? Esses são pontos importantes, pois se o receptor é endógeno, o principal problema é a sensibilidade do método de detecção, que às vezes pode ser difícil de detectar uma proteína endógena em relação a uma superexpressa. Além disso, se a GPL-1 pertencer a uma espécie diferente, que você está tentando expressar em excesso no Min-6, ela pode não funcionar, já que a maquinaria celular pode não suportar sua produção (embora improvável) ou seu transporte para a superfície da célula, o que eu já tive esse problema antes. Pode ser que, para os níveis de expressão específicos que você tem nessas células, se o GLP-1 for superexpresso ou se for não endógeno, ele causa toxicidade e mata as células que o expressam, por isso você não vê nenhum GLP- 1 expressão (por exemplo, devido à ativação excessiva do receptor). Você também poderia esclarecer o que você quer dizer com "analógico para glp-1"? isso significa que não é exatamente GPL-1 ou um homólogo ou ortólogo, que você está tentando detectar usando um anticorpo específico para GLP-1? isso pode ser um problema novamente se o Ab GLP-1 que você está usando detecta uma região do receptor, que não é conservada em seus homólogos.

Em termos de soluções apontadas nos comentários, a melhor maneira de fazer isso é usar um Ab policlonal, que é levantado contra uma grande seção do peptídeo em questão, permitindo uma melhor chance de sua detecção. Se isso não funcionar, você pode ter que recorrer à detecção de mRNA do GLP-1 usando RT-PCR ou qPCR, para o qual você precisará projetar primers com base em sua sequência GPL-1, para a qual você pode obter ajuda aqui.


Receptor Toll-like

Receptores semelhantes a portagens (TLRs) são uma classe de proteínas que desempenham um papel fundamental no sistema imunológico inato. Eles são receptores que abrangem a membrana de passagem única geralmente expressos em células sentinela, como macrófagos e células dendríticas, que reconhecem moléculas estruturalmente conservadas derivadas de micróbios. Uma vez que esses micróbios tenham rompido as barreiras físicas, como a pele ou a mucosa do trato intestinal, eles são reconhecidos pelos TLRs, que ativam as respostas das células imunológicas. Os TLRs incluem TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9, TLR10, TLR11, TLR12 e TLR13, embora os três últimos não sejam encontrados em humanos, [1] e não haja um funcional gene para TLR10 em camundongos. [2] TLR1, TLR2, TLR4, TLR5, TLR6 e TLR10 estão localizados na membrana celular, enquanto TLR3, TLR7, TLR8 e TLR9 estão localizados em vesículas intracelulares (porque são sensores de ácidos nucleicos). [3]

Os TLRs receberam seu nome por sua semelhança com a proteína codificada pelo gene toll identificado em Drosófila em 1985 por Christiane Nüsslein-Volhard e Eric Wieschaus. [4]


Linfócitos T Helper

O TH os linfócitos funcionam indiretamente para identificar patógenos potenciais para outras células do sistema imunológico. Essas células são importantes para infecções extracelulares, como as causadas por certas bactérias, helmintos e protozoários. TH os linfócitos reconhecem antígenos específicos exibidos nos complexos MHC II de APCs. Existem duas populações principais de TH células: TH1 e TH2. THAs células 1 secretam citocinas para aumentar as atividades de macrófagos e outras células T. THAs células 1 ativam a ação das células T citotóxicas, bem como dos macrófagos. THAs células 2 estimulam as células B virgens a destruir invasores estranhos por meio da secreção de anticorpos. Seja um TH1 ou um TH2 o desenvolvimento da resposta imune depende dos tipos específicos de citocinas secretadas pelas células do sistema imune inato, que por sua vez depende da natureza do patógeno invasor.

O THA resposta mediada por 1 envolve macrófagos e está associada à inflamação. Lembre-se das defesas da linha de frente dos macrófagos envolvidos na resposta imune inata. Algumas bactérias intracelulares, como Mycobacterium tuberculosis, evoluíram para se multiplicar em macrófagos depois de serem engolfados. Esses patógenos fogem das tentativas dos macrófagos de destruir e digerir o patógeno. Quando M. tuberculosis infecção ocorre, os macrófagos podem estimular as células T virgens a se tornarem TH1 células. Estas células T estimuladas secretam citocinas específicas que enviam feedback ao macrófago para estimular suas capacidades digestivas e permitir que ele destrua o M. tuberculosis. Da mesma maneira, THOs macrófagos ativados por 1 também se tornam mais adequados para ingerir e matar células tumorais. Em resumo TH1 respostas são direcionadas a invasores intracelulares enquanto TH2 respostas são direcionadas para aqueles que são extracelulares.


2. Mecanismos básicos de dor

Fundamentalmente, o mecanismo básico da dor sofre três eventos & # x02014 transdução, transmissão e modulação quando há presença de estímulos nocivos. Por exemplo, a transdução ocorre ao longo da via nociceptiva seguindo esta ordem: (1) eventos de estímulo são convertidos em eventos de tecido químico (2) tecido químico e eventos de fenda sináptica são então transformados em eventos elétricos nos neurônios e (3) eventos elétricos no neurônios são transduzidos como eventos químicos nas sinapses. Após a conclusão da transdução, o seguinte mecanismo seria a transmissão. Ocorre transmitindo os eventos elétricos ao longo das vias neuronais, enquanto os neurotransmissores na fenda sináptica transmitem informações de um terminal pós-sináptico de uma célula para um terminal pré-sináptico de outra. Enquanto isso, o evento de modulação ocorre em todos os níveis das vias nociceptivas através do neurônio aferente primário, DH e centro cerebral superior por regulação para cima ou para baixo. Tudo isso leva a um resultado final, e o caminho da dor foi iniciado e concluído, permitindo-nos sentir a sensação dolorosa desencadeada pelo estímulo. A ilustração básica sobre a transmissão da dor é ilustrada na Figura 1.

A rota básica de transmissão da dor mediante estímulos nocivos em ordem ascendente e descendente e a ilustração da transmissão sináptica na fenda sináptica.

2.1. Neurônios

Os neurônios são conhecidos por serem um componente primário que conecta, recebe e processa todas as informações nociceptivas geradas a partir dos três eventos discutidos acima no SNC e no SNP. Três tipos de neurônios que existem em nosso corpo são neurônios sensoriais (neurônios aferentes), interneurônios (funções para retransmitir os sinais entre neurônios aferentes e eferentes) e neurônios motores (neurônios eferentes). Todos os neurônios são eletricamente excitáveis ​​e consistem na mesma divisão de partes: soma, axônio (mielinizado ou não mielinizado) e dendritos. Os neurônios estão conectados uns aos outros para formar redes neurais complexas em nosso corpo, onde os sinais químicos e elétricos são transmitidos por meio de conexões especializadas, que são chamadas de sinapses. Os sinais sinápticos enviados por um neurônio são recebidos pelos dendritos e soma (transmissão sináptica) de outro neurônio, e esses sinais podem ser de natureza inibitória ou excitatória, definidos pelos efeitos farmacológicos decorrentes do próprio sinal. Depois de receber os sinais por meio dos dendritos ou soma, os sinais são transmitidos dentro dos neurônios por axônios. Isso leva a breves pulsos gerados dentro do neurônio, conhecidos como potencial de ação, que se propagam do soma, viajam ao longo dos axônios para ativar as sinapses e são então enviados para outros neurônios, agindo como uma via para transportar os sinais de sua fonte para a medula espinhal ou para o cérebro, onde uma resposta é interpretada para ser executada. Existem duas classificações principais de neurônios especializados: neurônios sensoriais e neurônios motores. Os neurônios sensoriais, que estão localizados na derme e epiderme que funcionam para reagir ao toque semelhante ao estímulo, enviam esses sinais quando o estímulo está presente, enquanto a principal função dos neurônios motores é receber os sinais do cérebro e da coluna vertebral cordão seguido pela produção de respostas que causam contrações musculares e afetam as saídas glandulares, conforme mostrado na Figura 1. Sem a presença de neurônios no sistema nervoso para transmitir sinais, nosso corpo não pode reagir a estímulos perigosos do meio ambiente.

2.2. Axônios

Os axônios também são conhecidos como fibras nervosas, que são o principal componente de um neurônio que funciona para conduzir potenciais de ação em uma direção unilateral dos dendritos para os terminais axonais, bem como de um neurônio para outro. Os axônios podem estar na forma mielinizada ou não mielinizada. A presença da bainha de mielina de um axônio, conhecida como nó de Ranvier, aumenta a velocidade de propagação dos impulsos, pois eles viajam ao longo da fibra mielinizada por condução saltatória (geração de potencial de ação em cada nó de Ranvier) e atua como um isolante para evitar que os impulsos elétricos saiam do axônio durante a transmissão. Para fibras amielínicas, os impulsos se movem continuamente em um ritmo muito mais lento, em comparação com os mielinizados. Para neurônios aferentes primários, as fibras A & # x003b4 são mielinizadas, enquanto as fibras C não são mielinizadas. Para os neurônios eferentes, a maioria dos neurônios pré-ganglionares é mielinizada. Além disso, existem pequenas lacunas entre os nós de Ranvier. O nó de Ranvier contém um canal de K + e Na +, que atua como reserva para economizar energia do neurônio durante a transmissão do potencial de ação. Com base na velocidade de um impulso conduzido, diâmetro do axônio & # x02019s e função de um axônio, os neurônios sensoriais (aferentes) são classificados em três grupos principais & # x02014 Grupo A, B e C, enquanto os neurônios motores (eferentes) são agrupados em Tipo Ia, Ib, II, III e IV [2].

2.2.1. grupo A

As fibras nervosas do grupo A foram classificadas por Erlanger e Gasser como fibras mielinizadas. Ele pode ser subdividido em A & # x003b1, A & # x003b2, A & # x003b3 e A & # x003b4 com diferentes conjuntos de características cada. Essas fibras geralmente terminam nas lâminas I, III, IV e V da DH da medula espinhal com alguma projeção interna da lâmina II.

Tipo A & # x003b1: tanto o Tipo Ia quanto o Ib das fibras sensoriais das terminações do fuso muscular e do tendão de Golgi são agrupados neste tipo. É usado principalmente para determinar a função proprioceptiva.

Tipo A & # x003b2: é um tipo de mecanorreceptores de baixo limiar, cutâneo, de adaptação lenta ou rápida e é uma fibra aferente do tipo II do receptor de estiramento [2]. As fibras A & # x003b2 pertencem às lâminas III e IV.

Tipo A & # x003b3: Fibras aferentes Tipo II dos receptores de estiramento.

Tipo A & # x003b4: é conhecido como os nociceptores térmicos e mecânicos que terminam nas lâminas rexadas I e V [3]. É uma fibra aferente do Tipo III [4]. As fibras A & # x003b4 também são os menores nervos mielinizados e têm uma velocidade de condução relativamente rápida de 30 m / s. O diâmetro das fibras A & # x003b4 é de cerca de 2 & # x020135 & # x000b5m e responde a dor de curta duração e em pontada.

2.2.2. Grupo B

Esses grupos de fibras nervosas são moderadamente mielinizados com velocidades de condução de 3 & # x0201314 m / s. As fibras nervosas pré-ganglionares do sistema nervoso autônomo (SNA) e as fibras aferentes viscerais gerais pertencem a esse grupo.

2.2.3. Grupo C

As fibras nervosas do grupo C são amielínicas com menos de 2 & # x000b5m de diâmetro e têm uma velocidade de condução relativamente lenta de aproximadamente 2 & # x000b5m / s. As fibras nervosas nas raízes dorsais (fibras aferentes do tipo IV) e as fibras pós-ganglionares no SNA podem ser categorizadas neste grupo. Todas essas fibras têm função principalmente nociceptiva, transportando a informação sensorial e reunindo cerca de 70% das informações nociceptivas aferentes, que então entram na medula espinhal. As fibras C terminam nas lâminas I e II na substância cinzenta da medula espinhal [3]. Em termos de nocicepção, os nociceptores de fibras C são polimodais, que são ativados por estímulos térmicos, mecânicos e químicos. A ativação das fibras C é a partir de estímulos mal localizados, como sensação de queimação na pele. Em termos de neuroquímica, as fibras C podem ser classificadas como peptidérgicas ou não peptidérgicas, e cerca de 50% dessas fibras expressam neuropeptídeos, inclusive peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP), neuroquininas e substância P (SP).

Geralmente, os impulsos elétricos que viajam ao longo dos axônios podem ser projetados de duas maneiras & # x02014 as fibras nervosas aferentes ou eferentes. No PNS, as fibras nervosas aferentes são referidas como neurônios sensoriais, dos quais os axônios carregam as informações sensoriais de regiões do corpo para a medula espinhal, enquanto as fibras nervosas eferentes no PNS são neurônios motores pré-ganglionares e pós-ganglionares que carregam os impulsos de Os sinais de movimento motor saem da coluna para os órgãos efetores periféricos, que incluem o músculo esquelético e os músculos lisos, conforme mostrado na Figura 1. No SNP, os neurônios aferentes somas estão localizados nos gânglios e seus axônios transmitem os impulsos elétricos de gânglio a gânglio e, eventualmente, de volta à coluna vertebral. Os axônios dos neurônios sensoriais localizados na raiz dorsal são os principais responsáveis ​​pela transdução da informação somatossensorial por meio da interação com os receptores somatossensoriais. Somatossensorial é uma via neuronal sensorial complexa que responde principalmente a mudanças externas, a saber, toque superficial, estímulos auditivos e visuais. Os receptores somatossensoriais podem ser ativados por esses diferentes estímulos que atuam nos mecanorreceptores (incluindo a propriocepção), nociceptores, termorreceptores e quimiorreceptores.

2.3. Potencial de acção

A liberação dos neurotransmissores no terminal do axônio é desencadeada na entrada de Ca 2+, e os sinais nociceptivos são então transportados e enviados através de diferentes neurônios por um potencial de ação. Existem dois potenciais principais para desempenhar papéis únicos na produção do potencial de ação que permite a transmissão de sinais através dos neurônios. Eles são conhecidos como potencial de repouso e potencial de limiar dos neurônios. No axônio de um neurônio típico, o potencial de repouso e o potencial de limiar são aproximadamente & # x0221270 e & # x0221255 mV, respectivamente. Há mais Na + acumulado fora da célula do que K + dentro da célula e, portanto, o potencial de repouso das células é carregado negativamente. O movimento desses íons através da membrana da bicamada lipídica dos neurônios é estritamente dependente da ativação de diferentes canais iônicos. A conformação dos canais iônicos pode ser alterada para serem ativados ou inativados, permitindo assim o influxo ou efluxo de íons específicos. O potencial de ação nos neurônios é ilustrado na Figura 2.

O potencial de ação em neurônios.

Uma vez que os nociceptores são estimulados por um estímulo nocivo, dois tipos de potencial são gerados e somados no outeirinho do axônio, os potenciais pós-sinápticos inibitórios (IPSP) e os potenciais pós-sinápticos excitatórios (EPSP). Uma vez que o limiar de ativação é alcançado, o potencial de ação é então propagado através do axônio ao longo dos neurônios. Geralmente, o potencial de ação começa, quando o Na + entra através de um canal de Na + ativado por voltagem (Nav), que cria a natureza despolarizante do potencial de membrana. Quando o potencial limite é alcançado, todo o Nav os canais localizados no outeirinho do axônio são estimulados a se abrir, levando a uma despolarização completa até atingir o potencial máximo (+40 mV) dos neurônios. Neste ponto, o Nav canais retornam ao seu estado de repouso, e os canais K + ativados por voltagem (Kv) são ativados e abertos para permitir o efluxo de K +, causando repolarização dos neurônios. A forma do potencial de ação é estereotipada, o que significa que a amplitude e o curso de tempo de todos os potenciais de ação que ocorrem nas células são os mesmos. O efluxo contínuo de K + através do Kv e os canais de vazamento de K + fazem com que o potencial de membrana hiperpolarize, durante o período supostamente refratário dos neurônios. Eventualmente, os canais de K + se fecham e os transportadores de Na + / K + restauram o potencial de repouso, permitindo a entrada de três Na + e a saída de dois K +. Quando o potencial de ação viaja para o terminal do axônio, o Ca 2+ entra no terminal pré-sináptico através dos canais de Ca 2+ operados por tensão (VOCC), causando a transmissão sináptica [5,6].

2.4. Transmissão sináptica

As transmissões sinápticas são eventos químicos usados ​​para transmitir o impulso entre os neurônios. Há uma lacuna entre as membranas pré-sináptica e pós-sináptica, conhecida como fenda sináptica, onde ocorre a sinapse química. A transmissão sináptica começa com a chegada do potencial de ação ao terminal do axônio pré-sináptico. Um potencial de ação no terminal pré-sináptico cria despolarização da membrana, o que causa a abertura do Nav canais no terminal. A entrada de Na + leva a uma maior ativação do VOCC, permitindo que o Ca 2+ entre no terminal do axônio. Esses íons de cálcio se ligam à proteína sensível ao cálcio presente em um referido terminal, que posteriormente interage com o solúvel NProteínas do receptor da proteína de ativação do fator sensível a etilmaleimida (SNARE). O papel principal das proteínas SNARE é promover a fusão das vesículas sinápticas (também conhecidas como vesículas neurotransmissoras) com a membrana terminal do axônio pré-sináptica nos neurônios, o que causa a liberação imediata de seus conteúdos, incluindo neurotransmissores e Ca 2+ na sináptica fenda por exocitose. Os neurotransmissores livres se difundem através da fenda sináptica e se ligam aos seus canais iônicos controlados por ligantes cognatos que estão localizados na membrana do neurônio pós-sináptico adjacente, causando um potencial de ação localizado no axônio do segundo neurônio. Os sinais de impulso nesta via podem ser passados ​​de um neurônio para uma direção unilateral, como mostrado na Figura 1.

Existem quatro maneiras possíveis de encerrar a liberação de neurotransmissores. Esses métodos incluem: (1) desvio dos neurotransmissores para longe da fenda sináptica após a dissociação de seus receptores (2) remoção dos neurotransmissores pela astroglia (células gliais) encontrados na fenda sináptica (3) degradação enzimática dos neurotransmissores e ( 4) recaptação dos neurotransmissores no terminal do axônio que os libera.

2,5. Via de transmissão da dor

Fundamentalmente, a transmissão da dor é estritamente dependente do equilíbrio das influências excitatórias e inibitórias que atuam nos circuitos neuronais do sistema somatossensorial. Existem vários níveis de SNC envolvidos na transmissão da dor. Isso inclui a medula espinhal (supra-espinhal), o tronco cerebral (mesencéfalo, medula oblonga e ponte) e as regiões corticais (córtex cerebral), conforme mostrado na Figura 1. Normalmente, a DH da medula espinhal desempenha um papel crucial na integração de várias entradas na coluna, incluindo os neurônios aferentes primários e as redes interneurônicas locais, e também é responsável pelos sinais descendentes do centro supraespinhal.

Dentro do sistema ascendente, os nociceptores aferentes primários são responsáveis ​​por transmitir as informações nocivas recebidas aos neurônios de projeção na DH da medula espinhal. Em seguida, um subconjunto desses neurônios de projeção, por sua vez, transmite essas informações sensoriais até o tálamo, atingindo o córtex somatossensorial através do trato espinotalâmico, fornecendo informações sobre a intensidade e a localização do estímulo nocivo. O trato espinotalâmico está localizado na substância branca da medula espinhal e consiste em duas partes & # x02014 os tratos espinotalâmico lateral e espinotalâmico anterior, que têm diferentes cursos de função. O trato espinotalâmico lateral se concentra na transmissão da sensação de dor e temperatura, enquanto o trato espinotalâmico anterior carrega informações relacionadas ao toque bruto e à sensação de pressão firme em direção ao tálamo no cérebro.

Outros neurônios de projeção envolvem os córtices cingulado e insular por meio de conexões no núcleo parabraquial e na amígdala, contribuindo assim para as experiências de dor. Conforme mostrado na Figura 1, esta informação ascendente acessa os neurônios do cinza periaquedutal (PAG) e da medula rostral ventral (RVM) que é encontrada no mesencéfalo para engajar os sistemas de feedback descendentes, a fim de regular a saída da medula espinhal [ 4]. A função central do PAG é integrar as informações recebidas dos centros superiores do cérebro, incluindo o hipotálamo, amígdala e lobo frontal, bem como receber a entrada nociceptiva ascendente do DH. O PAG regula o processamento da informação nociceptiva na DH da medula espinhal por meio dos neurônios de projeção para RVM e tegmento pontino dorsolateral (DLPT). Os sistemas opióides e canabinoides endógenos e outros neurotransmissores, como 5-hidroxitriptamina (5-HT) e norepinefrina (NE), são fortemente expressos pelas vias PAG / RVM.


Associação entre polimorfismos do gene do receptor de GLP-1 com aprendizado de recompensa, anedonia e diagnóstico de depressão

Os receptores do peptídeo-1 semelhantes ao glucagon (GLP-1Rs) são amplamente expressos no cérebro. As evidências sugerem que eles podem desempenhar um papel nas respostas de recompensa e na neuroproteção. No entanto, a associação de GLP-1R com diagnóstico de anedonia e depressão não foi estudada. Aqui, examinamos a associação de polimorfismos do GLP-1R com medidas objetivas e subjetivas de anedonia, bem como o diagnóstico de depressão.

Medidas objetivas [viés de resposta avaliado pela tarefa de recompensa probabilística (PRT)] e subjetivas [Escala de Prazer Snaith-Hamilton (SHAPS)] de anedonia, variáveis ​​clínicas e amostras de DNA de 100 controles e 164 pacientes no Hospital McLean. Uma amostra independente genotipada como parte do Psychiatric Genomics Consortium (PGC) foi usada para estudar o efeito de supostos polimorfismos de GLP-1R ligados ao viés de resposta em PRT no diagnóstico de depressão.

O alelo C em rs1042044 foi significativamente associado ao aumento do viés de resposta do PRT, ao controlar por idade, sexo, status de caso-controle e discriminabilidade do PRT. O genótipo AA de rs1042044 apresentou maior fenótipo de anedonia com base nas pontuações SHAPS. No entanto, a análise dos dados do transtorno depressivo maior PGC não mostrou nenhuma associação entre rs1042044 e diagnóstico de depressão.

Os resultados sugerem uma possível associação de rs1042044 com anedonia, mas nenhuma associação com o diagnóstico de depressão.


Inibidores da ECA e tempestades de citocinas

As descobertas também podem levantar novas linhas de investigação em torno dos inibidores da ECA. Esses medicamentos são comumente usados ​​para tratar a hipertensão, que tem sido associada à doença COVID-19 mais grave. Os inibidores da ECA estão afetando o risco das pessoas?

“ACE e ACE2 funcionam na mesma via, mas na verdade têm propriedades bioquímicas diferentes”, adverte Ordovas-Montanes. “É uma biologia complexa, mas será importante entender o impacto dos inibidores da ECA na resposta fisiológica das pessoas ao vírus.”

Também é muito cedo para tentar relacionar os resultados do estudo à "tempestade de citocinas", uma resposta inflamatória descontrolada que foi relatada em pacientes com COVID-19 muito doentes. As citocinas são uma família de substâncias químicas que estimulam as respostas imunológicas do corpo para combater infecções, e o interferon faz parte da família.

“Pode ser que estejamos vendo uma tempestade de citocinas por causa de uma falha do interferon em restringir o vírus, para começar, então os pulmões começam a pedir mais ajuda. Isso é exatamente o que estamos tentando entender agora. ”


Imunohistoquímica (IHC)

A imunohistoquímica é uma técnica usada para determinar a presença e o nível de proteínas celulares específicas. IHC mede a expressão da proteína usando anticorpos especialmente marcados que podem se ligar às proteínas de interesse. O anticorpo é misturado com os componentes celulares do tumor. Após um determinado período de tempo, a mistura é enxaguada e apenas os anticorpos anexados aos seus alvos de proteína permanecerão. A presença dos anticorpos pode ser detectada observando-se a amostra ao microscópio, pois as áreas que contêm os anticorpos ligados aparecerão em uma cor diferente das áreas sem anticorpos. As amostras com mais proteína ligam-se a mais anticorpos e, portanto, parecem mais escuras. Isso permite que o teste revele não apenas se uma proteína está presente, mas também a quantia da proteína. Os resultados do teste são baseados na força da coloração e na porcentagem de células coradas.123

IHC é uma técnica comumente usada porque é barata de realizar, não requer equipamento especial e geralmente bastante precisa.413

Como exemplo, três proteínas de interesse particular para o câncer de mama são HER2, o receptor de estrogênio (ER) e o receptor de progesterona (PR).

HER2 é um receptor do fator de crescimento localizado na superfície das células mamárias. Cerca de 30% das pacientes com câncer de mama têm tumores que expressam uma grande quantidade de HER2. O medicamento anticâncer Herceptin® é direcionado a essa proteína, tornando a determinação precisa da presença ou ausência dessa proteína em um tumor uma etapa importante na determinação do tratamento apropriado.
Saiba mais sobre Herceptin®
Saiba mais sobre HER2

o ER a proteína é outro receptor do fator de crescimento. A proteína ER se liga ao hormônio sexual feminino estrogênio e desempenha um papel importante na estimulação da divisão celular nas células da mama. Como os medicamentos que interferem na sinalização do estrogênio são uma ferramenta importante no tratamento do câncer de mama, a determinação precisa dos níveis de ER é importante para o desenho dos planos de tratamento.
Saiba mais sobre tratamentos hormonais para câncer de mama

o PR a proteína é o receptor do hormônio sexual feminino progesterona. Embora não existam terapias direcionadas contra a proteína PR, a presença ou ausência do receptor nas células cancerosas é um fator na determinação do prognóstico da doença. Saiba mais sobre ER e PR

A imunohistoquímica (IHC) é um método de detecção de proteínas nas células. As proteínas que se ligam ao alvo são adicionadas às células e, em seguida, proteínas coloridas são adicionadas. Se o alvo estiver presente, a cor será detectada com um microscópio ou outra máquina.


O que é o receptor LDL?

Todos precisam de uma certa quantidade de colesterol para serem saudáveis. A maior parte do colesterol é produzida por nosso corpo, e outro colesterol entra em nosso corpo nos alimentos que comemos. Um componente principal do controle do colesterol no corpo é o receptor de lipoproteína de baixa densidade, também conhecido como receptor de LDL.

O que o receptor LDL faz?

O mau funcionamento dos receptores de LDL pode causar um acúmulo de colesterol nas artérias.

A principal função dos receptores de LDL é manter a quantidade de colesterol no sangue em um nível normal. Os receptores de LDL estão do lado de fora de muitas células diferentes. Quando as lipoproteínas de baixa densidade, às vezes chamadas de colesterol “ruim”, circulam pelo corpo, os receptores de LDL as captam e os levam para dentro da célula. Depois que os receptores de LDL terminam de colocar os LDLs na célula, eles voltam à superfície da célula para coletar mais LDLs e repetir o processo novamente.

É dentro da célula que os LDLs criam o colesterol. O colesterol é uma substância gordurosa e cerosa que ajuda a manter o funcionamento correto do corpo. Quando o colesterol está dentro de nossas células, ele é usado pela célula, armazenado ou expelido do corpo.

Muitos de nossos receptores de LDL são encontrados no fígado. O fígado trabalha muito para se livrar do colesterol desnecessário. Quanto mais receptores de LDL, mais rapidamente o colesterol LDL é removido do corpo.

Como as mutações genéticas podem afetar o receptor de LDL?

Uma mutação no gene do receptor de LDL pode resultar em colesterol elevado. Quando os receptores de LDL não funcionam corretamente, o LDL permanece na corrente sanguínea por mais tempo do que deveria. O LDL então penetra nas paredes das artérias, onde pode endurecer e estreitar as passagens nas artérias.

A hipercolesterolemia familiar (FH) é um distúrbio hereditário que faz com que altos níveis de LDLs estejam presentes no corpo e é freqüentemente causado por uma mutação do gene do receptor de LDL. A FH pode causar doenças cardiovasculares precoces e ataques cardíacos em uma idade jovem. Devido aos altos níveis de LDL, o FH pode ter o sintoma de depósitos de gordura na pele e nos tendões.

O que você deve fazer se tiver FH?

Uma dieta rica em vegetais, frutas e grãos inteiros pode levar a níveis mais baixos de LDL.

Infelizmente, menos de 10% das pessoas que têm FH sabem que são afetadas por ela. A maioria das pessoas com FH não sabe que tem essa condição e pode não descobrir até que sofra um ataque cardíaco.

Embora o FH nunca desapareça e o receptor de LDL em uma pessoa afetada nunca funcione corretamente, existem medidas que podem ser tomadas para melhorar os níveis de colesterol. Alguém com FH deve garantir que está fazendo a quantidade adequada de exercícios, conforme recomendado por seu médico. Eles também devem seguir uma dieta saudável para o coração. Não fumar e manter a pressão arterial em níveis seguros também são mudanças importantes no estilo de vida. A medicação também pode ser prescrita por um médico para controlar os níveis de colesterol devido a FH e receptores de LDL com mau funcionamento.


Como você expressa e detecta os receptores GLP-1? - Biologia

O sentido do paladar é estimulado quando nutrientes ou outros compostos químicos ativam células receptoras especializadas na cavidade oral. O paladar nos ajuda a decidir o que comer e influencia a eficiência com que digerimos esses alimentos. As habilidades do paladar humano foram moldadas, em grande parte, pelos nichos ecológicos que nossos ancestrais evolucionários ocuparam e pelos nutrientes que eles buscaram. Os primeiros hominídeos buscavam nutrição em um ambiente fechado de floresta tropical, provavelmente comendo principalmente frutas e folhas, e os primeiros hominídeos trocaram esse ambiente pela savana e expandiram enormemente seu repertório alimentar. Eles teriam usado o sentido do paladar para identificar alimentos nutritivos. Os riscos de fazer seleções inadequadas de alimentos ao forragear não envolvem apenas o desperdício de energia e os danos metabólicos decorrentes da ingestão de alimentos com baixo teor de nutrientes e energia, mas também a ingestão prejudicial e potencialmente letal de toxinas. As consequências aprendidas dos alimentos ingeridos podem, subsequentemente, guiar nossas futuras escolhas alimentares. As habilidades gustativas evoluídas dos humanos ainda são úteis para um bilhão de humanos que vivem com baixíssima segurança alimentar, ajudando-os a identificar os nutrientes. Mas para aqueles que têm acesso fácil a alimentos saborosos e ricos em energia, nossa sensibilidade a alimentos açucarados, salgados e gordurosos também ajudou a causar doenças relacionadas à nutrição, como obesidade e diabetes.


Reflexos e respostas ao estresse

Um argumento que às vezes é usado para sugerir que um feto pode sentir dor antes do terceiro trimestre é que o feto pode ter um reflexo de retração ou a capacidade de se afastar de algo quando tocado.

Mas realizar uma ação reflexa e perceber a dor são duas coisas diferentes, disse Davis. Considere, por exemplo, quando um médico testa seus reflexos batendo no joelho com um martelo de borracha. Seu pé vai chutar, independentemente de você sentir dor ou não.

"Muitos reflexos ocorrem no nível da medula espinhal" e não envolvem o cérebro de forma alguma, disse Davis. Mas o cérebro é essencial para perceber a dor, disse ela. [5 fatos dolorosos que você precisa saber]

Another argument is that a fetus in the second trimester can display certain stress responses, such as increased levels of stress hormones, including cortisol and endorphins. However, the authors of the JAMA review noted that these hormones aren't specific to pain (for example, other stressful conditions may affect their levels). In addition, the hormones are not regulated by the part of the brain associated with consciousness, the authors wrote.


Leptina


Figure 5. Recombinant leptin standard accurately determines leptin concentrations in biological matrices.


Related Products
Alvo Obesidade Diabetes Cardiovascular Disease Câncer
Adiponectin ELISA Kit x x x
AMP'D®, GLP-1 ELISA Kit x x
Annexin V ELISA Kit x
Bcl-2 ELISA Kit x
Gastrin I ELISA Kit x
Insulin ELISA Kit x x
KIM-1 ELISA Kit x x
Leptin ELISA Kit x
NGAL ELISA Kit x x x x
p53 ELISA Kit x
Proinsulin ELISA Kit x
Vitamin D ELISA Kit x x x

Table 1. Detection kits of metabolic analytes.


Metabolic biomarkers play an important role both in diagnosis and prognosis. In addition to Immunoassays, we offer many antibodies, proteins, and small molecules for metabolic research. Please contact our Technical Support Team for further assistance.


Assista o vídeo: Vídeo aula #020. Ativação do Receptor Hormonal - Parte 1 (Agosto 2022).